Drei Faktoren, die die Zentrifugalwirkung der Zentrifuge beeinflussen
Erstens die Zentrifugationszeit
Die Zentrifugationszeit ist ein sehr wichtiger Faktor, der die Zentrifugalwirkung beeinflusst. Die für verschiedene Zentrifugationsmethoden erforderliche Zentrifugationszeit ist unterschiedlich. Das Folgende ist eine detaillierte Einführung der Differentialzentrifugation und Zentrifugation mit gleichem Dichtegradienten und Dichtegradientenzentrifugation. Bei der differentiellen Zentrifugation bezieht sich die Zentrifugationszeit auf die Zeit, zu der sich ein bestimmtes Teilchen vollständig am Boden des Zentrifugenröhrchens absetzt; für die Iso-Dichtegradientenzentrifugation bezieht sich die Zentrifugationszeit auf die Gleichgewichtszeit, bei der das Teilchen den Iso-Dichtepunkt vollständig erreicht; Die Zentrifugationszeit einer Dichtegradientenzentrifugation bezieht sich auf die Zeit zum Bilden einer wohldefinierten Zone. Für die beiden letztgenannten Zentrifugationsmethoden ist die erforderliche Zonenbildungszeit oder Gleichgewichtszeit kompliziert und kann nach dem Test bestimmt werden.
Zweitens die Zentrifugalgeschwindigkeit
Die Rotationsgeschwindigkeit der Zentrifuge wird hauptsächlich durch die Rotationsgeschwindigkeit des Rotors und den Rotationsradius der Partikel bestimmt. Bei der Beschreibung der Zentrifugalbedingungen wird dies häufig durch das relative Zentrifugalkraftfeld ausgedrückt. In der tatsächlichen Arbeit beziehen sich die Daten des Zentrifugalkraftfeldes auf den Durchschnittswert, d. H. Bezieht sich auf das Zentrifugalkraftfeld der Partikel an der Stelle in der Zentrifugationslösung.
Drittens der pH-Wert und die Temperatur des Zentrifugenmediums
Der pH-Wert des Zentrifugationsmediums wird im Allgemeinen in dem pH-Bereich eingestellt, in dem das Enzym stabil ist. Eine Pufferlösung kann verwendet werden. Bei dem Test wird das Wiegen durchgeführt und die Umgebung der Zentrifuge selbst wird korrodiert, indem die Umgebung von Persäure oder Überbasis vermieden wird.
Bei der Arbeit mit einer Zentrifuge müssen wir nicht nur der Auswahl des Zentrifugalmediums besondere Aufmerksamkeit schenken, sondern auch die Temperatur und den pH-Wert der Mediumlösung kontrollieren, um Agglutination, Denaturierung und Desaktivierung der getrennten Substanzen zu verhindern. Wir werden die Zentrifugationstemperatur auf etwa 4 ° C regeln. Bei einigen Enzymen mit guter thermischer Stabilität kann die Zentrifugation auch bei Raumtemperatur durchgeführt werden.